Tomando Peñafiel como localidad de referencia, la Ribera del Duero de Valladolid se sitúa en pleno centro de la comunidad autónoma de Castilla y León, en España.

La principal vía de comunicación es la carretera nacional N-122, que recorre la Ribera paralela al Duero y que próximamente se convertirá en autovía. Comunica Valladolid con Aranda de Duero y Zaragoza hacia el Este, y con Zamora y Portugal hacia el Oeste.

Para llegar desde el Norte y el Sur peninsular (Bilbao o Madrid) podemos tomar la autovía A-1, que atraviesa perpendicularmente la Ribera del Duero. Otra opción para venir directamente desde Madrid a Peñafiel es a través de Segovia y Cuéllar, por la carretera regional CL-601 y otras carreteras en muy buen estado.